超微量分光光度計的光路設(shè)計與檢測原理

　　超微量分光光度計通過優(yōu)化光路設(shè)計與創(chuàng)新檢測原理，實現(xiàn)了對微升級別生物樣本的高精度分析，其核心機制可歸納為以下方面：

　　一、光路設(shè)計：突破傳統(tǒng)，實現(xiàn)微量檢測

　　液柱光程固定技術(shù)

　　利用液體表面張力，在上下檢測板間形成固定厚度液柱（如0.05mm或0.2mm）替代傳統(tǒng)比色皿。液柱高度作為光程，確保光路穩(wěn)定，同時避免因光徑不一致導(dǎo)致的誤差。部分機型采用可變光程技術(shù)（如0.02-1mm動態(tài)調(diào)節(jié)），通過實時吸光度數(shù)據(jù)自動調(diào)整光程，擴展檢測濃度范圍。

　　四光程檢測設(shè)計

　　采用四光程檢測方式，提升檢測穩(wěn)定性、重復(fù)性和線性。相較于傳統(tǒng)單光程或雙光程系統(tǒng)，四光程設(shè)計能夠提供更大范圍的檢測量程，并確保測量結(jié)果的一致性和準(zhǔn)確性。

　　光纖樣本拉伸技術(shù)

　　部分機型通過光纖樣本拉伸設(shè)計，利用液體表面張力形成1mm固定光程薄膜，無需傳統(tǒng)耗材比色皿。光纖采用石英材質(zhì)，表面精細(xì)拋光，不附著液體，只需濾紙擦拭即可去除殘留，同時光纖封套采用316L不銹鋼，抗腐蝕性強，適用于復(fù)雜生物樣品。

　　二、檢測原理：基于朗伯-比爾定律的高精度分析

　　朗伯-比爾定律應(yīng)用

　　該定律指出，吸光度（A）與樣品濃度（C）和光程長度（L）成正比，公式為

　　A=ε⋅C⋅L，其中ε

　　為摩爾吸光系數(shù)。超微量分光光度計通過測量特定波長下的吸光度，結(jié)合已知的摩爾吸光系數(shù)，計算出樣品濃度。

　　多波長同步檢測

　　支持全光譜掃描（190-850nm），可同時檢測多個波長（如260nm核酸、280nm蛋白質(zhì)、230nm鹽離子），通過多參數(shù)分析評估樣品純度與濃度。例如，A260/A280比值用于判斷核酸純度，高純度DNA比值應(yīng)在1.8-2.0之間。

　　高靈敏度檢測系統(tǒng)

　　配備高穩(wěn)定性光源（如脈沖氙燈或LED），壽命長達(dá)5000小時以上，減少預(yù)熱時間與光強波動。檢測器采用紫外增強型CCD或硅光電池，響應(yīng)線性范圍廣，可捕捉微弱信號（如0.5pg/μLdsDNA），同時避免飽和效應(yīng)。